完美生科院 2022-07-26 10:19:21
大健康时代席卷而来
如何保障产品新成分的功效性与安全性?
今天,我们从细胞与分子入手
探索其中的奥秘
走进完美生科院
细胞与生化分子实验室
硬件条件
细胞是一种非常娇贵的实验对象,容易被细菌、真菌、支原体、衣原体等污染导致实验偏差。
为保证细胞品系的成功传代和实验的顺利开展,完美生科院生化分子实验室配备了无菌、恒温恒湿的细胞培养操作体系,包括细胞准备间、无菌操作间及生化分子实验室。
细胞准备间
清洁无菌的实验用品是保证细胞实验顺利开展的基础和前提
开展一切与细胞实验相关的准备工作,如试剂耗材灭菌、常用试剂配制等。
仪器设备:高压蒸汽灭菌锅、高温干热灭菌箱、液氮罐等。
(液氮罐)
(灭菌锅)
细胞操作间
保证无菌条件下对细胞进行培养及实验处理
操作间又分更衣区、无菌操作间两大板块:更衣区处于最外部,与外界相互连通,为实验操作人员提供实验衣着准备;无菌操作间由内外两间组成,外间作为缓冲,用于准备工作,内间仅限于细胞培养及其它无菌操作。
仪器设备:生物安全柜、二氧化碳培养箱、倒置荧光显微镜、自动细胞计数仪、离心机等。
(离心机)
(生物安全柜)
生化分子实验室
对细胞的生物学功能进行检测鉴定
对细胞进行处理后,展开生物指标检测(酶活性、基因表达、蛋白表达等),可以为原料和产品的功效及安全提供科学有效的数据支持。
仪器设备:多功能酶标仪、超微量蛋白核酸分析仪、PCR仪、实时荧光定量PCR仪、化学发光荧光成像仪等。
(化学发光荧光成像仪)
(多功能酶标仪)
软件条件
细胞系
实验室拥有多株实验用细胞品系,包括RAW 264.7 (小鼠单核巨噬细胞白血病细胞),B16 (小鼠黑色素瘤细胞),SZ95 (人皮脂腺细胞),HFS (人皮肤成纤维细胞),Hacat (人永生化表皮细胞),BPH-1 (人前列腺增生细胞),MC3T3-E1 Subclone 14 (小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14),hGF (人牙龈成纤维细胞) ,MC3T3-E1(小鼠成骨细胞), Caco-2(人结直肠腺癌细胞),DPCs(人毛乳头细胞)等。
(人牙龈成纤维细胞、人永生化表皮细胞和小鼠单核巨噬细胞)
(人毛乳头细胞、小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14和小鼠黑色素瘤细胞)
人体细胞种类丰富多彩,不同部位的细胞特性不同,研究的靶点和通路也有所差异,我们拥有丰富的细胞系,可以针对起效部位的差异选择合适品系的细胞开展安全与功能评价实验,使得对成分的研究有更全面、深入的结论。
评价方法:化妆品功效评价
可开展舒缓、美白、控油、修护、抗紫外等多项评价,基本涵盖《化妆品功效宣称评价规范》常见的功效宣称。
例如:基于SZ95细胞开展皮脂腺细胞的油脂分泌分析;基于HaCaT细胞开展防紫外及蓝光损伤,抗皱紧致、屏障修护等功效评价实验。
评价方法:健康食品功效评价
可开展增强骨密度、改善前列腺等多项健康功效评价。
例如:基于BPH-1细胞通过检测细胞增殖和细胞凋亡开展改善前列腺增生研究;基于RAW 264.7细胞通过检测免疫因子开展免疫调节研究。
(HaCaT细胞-屏障修护:划痕实验)
(SZ95细胞-控油:尼罗红染色实验)
评价方法:机理评价
相信生活中大家都遇到过面部肌肤问题,例如红肿瘙痒、干燥掉皮,皮肤刺痛或发紧,甚至敏感的情况,其实这些现象与我们的皮肤屏障受损有着极大的联系。
皮肤屏障到底是什么呢?我们通常用“砖块-灰浆”结构来形容皮肤屏障结构,它由皮脂膜、角质层角蛋白、脂质等共同构成, 一起抵御外界有害、刺激物及日光进入,同时具有保湿及调节抗炎作用。而一旦屏障结构成分或比例发生改变,角质细胞损伤,角质层屏障功能必将受损。
因此,增强角质形成细胞创面愈合相关的功能活动,是促进皮肤损伤修护和屏障功能的潜在手段。
角质层细胞及其内部的结构蛋白(Filaggrin / Loricrin / Keratin 1),构成角质形成细胞支架的胶原蛋白(COL I / COL IV),细胞间的紧密连接蛋白(Claudin 1 / Occludin), 角质层细胞间脂质(CERs / FFAs / CHOL)等均可作为靶标因子来评估受试物的屏障修护作用。
生科院细胞分子实验室以角质形成细胞(HaCaT)为研究对象,评价护肤类产品对于皮肤细胞的修护功效,并研究其修护功效的作用靶点和相关蛋白及基因的变化情况,更深入的分析产品作用机理,使用现代分子生物学实验技术来促进化妆品的研发,提升产品的科技含量。
结语
现如今各类细胞培养技术日趋成熟,体外培养细胞具有实用性高、实验成本低 (细胞体积小)、实验周期短 (增殖速度快)、实验体系成熟的特点。 时至今日,细胞模型已被广泛应用于生命科学、医药学、食品科学等各大领域中进行原料成分功效评价 。
目前,细胞模型的研究主要用于对原料及产品进行毒性、安全性及功效测试 ;运用分子生物学、基因工程学等手段,对原料或成品进行功效评价,为营养保健品、化妆品成分的有效评估提供科学数据支持 。
完美生科院运用生化分子实验室开展研发技术服务,进行各类安全与功效评价,积极与各大科研机构及高校专家合作,充分利用实验室资源。通过相互交流,共同促进健康食品和化妆品行业的发展!
责编:樊汝琴
来源:完美生科院
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